確かに脳はしわになりやすいですね。 もう試されているかもしれませんが、組織以外の余分なパラフィンを切り落としてやると、しわの入る余地が少なくなります。 あと私は40℃のWater bathに10～20分浮かべて、切片を拾ったら50℃の伸展板で数時間おいてます。 とある病理組織をパラフィン包埋した後、ミクロトームで切片を切ろうとしたのですが、きれいに切れません。パラフィンのところはきれいに切れたのですが、組織のところでボロボロになってしまいます。ミクロトームの刃を代えてもだめで、いろいろ条件を変えてみてもだめでした。包埋しなおした方がいいのでしょうか？何か解決策があれば教えてください。ちなみに厚みは４μです。EDTAによる抗体賦活化を行うと切片がはがれてしまうのですが…初めて質問させていただきます。トルイジンブルー染色とは、何を染める染色法なのでしょうか？検索したところ、脂肪細胞、多糖類等と書いてあったのですが、神経細胞を染める場合、具体的に（核、など）何を染めることができるのでしょうか？また、組織の細胞を全体的に見る場合、メチレンブルーとどちらが適しているのでしょうか？よろしくお願いいたします。お探しのQ&Aが見つからない時は、教えて!gooで質問しましょう！マウスの胚(E11.5)の凍結切片の作製を行なっているのですが、顕微鏡で観察すると組織のところに泡が入っていて泡のある部分の組織が崩れたり、抜けてしまっています。包埋の条件は解剖後、4%PFAで4℃45分固定後15%, 30% シュークロース／PBSで置換した後、コンパウンドで包埋してドライアイス上で凍結しています。クリオスタットの庫内の温度は－20℃で切片の厚さは10μmです。包埋する時にコンパウンドには泡が入っておりません。また組織の周辺に泡は見られず組織の中にみられます。解決方法で考えられることがございましたら、よろしくお願いいたします。 る．徳安は，作製された凍結切片を蔗糖滴の表面に接着させ て，チャンバー外（常温）に回収する方法を開発した．その 手法を用いた免疫電顕法による生体分子の局在解析は，1980 ～1990 年代の細胞生物系の一流雑誌を席巻し，徳安法とし て用いられるようになった1）． 2. しわになりやすい大きな組織はゆっくり丁寧に切る 。必要に応じ湯伸ばしを行う。 ②染色間違え防止 ・伸展板にスライドを並べる時には染色間違えを防ぐために 、染色ごとに置く場所を決 める。 ③鏡検チェックによる振り返り ・ブロックのマーキングから自分で作製した標本が容易に検索� クリオスタットで組織から連続凍結切片を作成するコツ ツイート 組織化学染色や免疫組織染色の実験のために凍結組織からクリオスタット（クライオスタット）で連続切片を作る際に、私が気を付けていることをメモってみました。 ここでは私が主に行ってきた方法を述べています。 ラボの� 利点 : 形態保持に優れており、パラフィンブロックは比較的長期間保存できるため、組織や胚を安定に保存することができます。 2. 試行錯誤の上、徐々に綺麗な脳切片を作ることができるようになってきたのですが、 どうしてもスライドガラス貼り付けの際に、サンプルにしわができてしまい、 見たい領域が見えないサンプルが多くできてしまいます。 そこで、解決策はないかと、 さらに、私は脳組織を主に薄切していたのですが、その際には、1％酢酸水を温めたものに切片を浮かせて伸ばし、スライドグラスにすくってました。こうすると、きれいにしわもなく伸び、他の組織切片を作製する際も、多少臭いですが、きれいに仕上がるのでこの方法で行ってました。
欠点 : 染色過程で有機溶媒を用いるため、脂質は失われ、加温操作のためにタンパク質の抗原性が失われる可能性があります。 1.
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